角質(zhì)層制片光學(xué)特征-葉的下角質(zhì)層觀(guān)察顯微鏡
永久裝片
甘油膠是包埋角質(zhì)層的理想制片荊。它不但具有極好的光學(xué)特性,易
于操作,而且在包埋期間仍可處理角質(zhì)層。包埋前,角質(zhì)層要存放在甘油
水溶液中,并加幾滴石炭酸,以防止真藺生長(cháng)。被包埋在加拿大樹(shù)膠或合
成樹(shù)脂中的角質(zhì)層,首先需要將其放到通常會(huì )毀壞易碎材料的二鉀苯或乙
酸中脫水.因為粘度高,用這些溶荊包埋的玻片通常很厚,并且角質(zhì)層不容
易放平。經(jīng)過(guò)一些年以后,加拿大樹(shù)膠還會(huì )泛黃變暗.
用甘油膠包埋的一個(gè)主要問(wèn)題是產(chǎn)生氣泡。市場(chǎng)上出售的新鮮的甘油
膠常含有大量的水分和空氣。為排除其中的空氣,并去掉多余的水分,可
將甘油膠置于燒杯中,燒杯放到水浴鍋中,加熱幾天,直到它的顏色變成
深黃色。在用甘油膠包埋以前,角質(zhì)層本身應在純甘油中脫水至少1天。在
實(shí)際包埋時(shí),顯微鏡玻片可放到一個(gè)具精確溫控的加熱盤(pán)中,沮度控制在6
5℃-73℃,用玻瑞棒將加熱的甘油膠移到玻片上。角質(zhì)層皿于甘油膠中,
并用一大小適中的蓋玻片蓋上。較大的角質(zhì)層可能會(huì )有些問(wèn)題,因為它們
不能完全放平,因此需要用蓋玻片支持。為此目的,一個(gè)碎的蓋玻片都比
橡皮泥要好,因為前者在照片中不會(huì )明顯地顯示出來(lái)。為了防止隨后的干
燥,在甘油膠變硬之后,蓋玻片可用無(wú)色的指甲油來(lái)封存。不過(guò),對一些
較大的或較厚的玻片,需要長(cháng)達數月甘油膠才會(huì )變硬。
如上所述,甘油膠的優(yōu)點(diǎn)之一是在包埋時(shí)角質(zhì)層還可以處理。當玻片
置于加熱盤(pán)時(shí),可將角質(zhì)層在玻片上攤開(kāi)。而且,葉的下角質(zhì)層通常還較
牢固地粘在一起.需要機械分離.當把它們移到玻片上加熱的甘油膠中時(shí),
最好用細針將其分開(kāi)。
角質(zhì)層在固定前還可以染色.但在染色時(shí),由于角質(zhì)層非常容易碎,所
以很容易受到破壞。4種染色劑都有明顯不同的特征。最常用染色劑有:傅
斯麥棕、甲基綠、亞甲藍和番紅T,其中稗斯麥棕能產(chǎn)生最自然的色彩。所
有這些染色劑都要在1%的水溶液中使用,并需要染幾分鐘。如果有必要,
還要放在40℃條件下。染色以后.角質(zhì)層要用水和熱的甘油沖洗。不同的種
類(lèi),即使采自同一采集地點(diǎn),染色效果也會(huì )不同。