生物實(shí)驗-高分子化合物的混合物電泳的應用
電泳的應用
電泳技術(shù)可以用于帶凈電荷分子的分離。低壓紙電泳已
廣泛地用于氨基酸、多膚、蛋白質(zhì)、核普酸、核酸以及帶電碳水
化合物衍生物的分離。但是,小分子在紙上進(jìn)行低壓電泳時(shí)
會(huì )發(fā)生明顯的擴散。對小分子要得到更好的分離,一般使用
高壓電泳,因為分離所需要的時(shí)間較短,因此分子擴散較小。
醋酸纖維素在某種程度上已取代了紙作為支持介質(zhì)。高純度
的醋酸纖維素對樣品的吸附作用要比紙小,因此對樣品成分
能得到較好的分辨率。醋酸纖維素還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn),即由于支
持介質(zhì)染色的本底較淺,而能更好的顯示各種成分�?崴崂w
維素電泳在臨床上已廣泛地用于分離血清蛋白(包括塘蛋白
和脂蛋白)和血紅蛋白,并且也用于免疫電泳。紙層和薄層高
壓電泳都能用于分離由于各種代謝紊亂而有可能以高濃度存
在于血漿和尿中的氨基酸。薄層電泳對于分離氨基酸和核昔
酸一類(lèi)較小的分子特別有用,因為它分離迅速,具有好的分辨
率,并且由于它可用于雙向分離,所以可以進(jìn)行蛋白質(zhì)和核酸
水解物的“指紋圖譜”分析。薄層電泳也可用于胺類(lèi)、茶酚類(lèi)、
酚類(lèi)和無(wú)機離子的分離。
凝膠作為電泳分離的支持介質(zhì),大大地擴大了這種技術(shù)
的使用范圍。聚丙烯酞胺一類(lèi)凝膠的孔徑可以選擇,以促使
帶有相同電荷,但具有不同大小和形狀的分子的分離,這是一
個(gè)很大的優(yōu)點(diǎn)。因此,凝膠電泳非常適合于核酸(特別是RNA
分子)和蛋白質(zhì)(包括酶、同功酶和結構蛋白)混合物的分離。
淀粉和瓊脂凝膠的孔徑不像聚丙烯酚胺那樣熊被控制,但是,
這些凝膠已發(fā)現在分離高分子化合物的混合物中是有用的。
等電聚焦和等速電泳在分析水平上具有很好的分辨率,
但是,與幕式電泳一樣更適用于制備工作。這些技術(shù)能用于
分離較大量的物質(zhì),并且在分離結束后能回收這些物質(zhì)。多
肚、蛋白質(zhì)、核普酸等已用這些技術(shù)進(jìn)行了成功的分離。