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恒冷箱切片是光學(xué)顯微鏡酶組織化學(xué)常用較佳切片




來(lái)源:yiyi
時(shí)間:2016-11-14 18:51:46

恒冷箱切片是光學(xué)顯微鏡酶組織化學(xué)常用較佳切片

  切片

  根據實(shí)驗需要,切片可用恒冷箱切片、組織切片機切片、振動(dòng)切片
機切片和刀片手切等。

  恒冷箱切片

  恒冷箱切片是光鏡酶組織化學(xué)中常用的較佳切片。新鮮組織或固定
材料在恒定的冷室、恒定的溫度下能制成厚薄均勻的、無(wú)人工假象的切
片。這種切片可作為電鏡酶細胞化學(xué)實(shí)驗的預試驗和并行觀(guān)察。尤其是
定量酶細胞化學(xué),一般用光鏡組織化學(xué)反應進(jìn)行定量測定,用電鏡酶細
胞化學(xué)反應確定酶的定位差異,兩者結果互為補充。

  冰凍組織時(shí),細胞質(zhì)和細胞間質(zhì)的溫度從冰點(diǎn)(約-2℃)到再結晶(
-130℃)之間會(huì )產(chǎn)生冰晶,冰晶的形成是由于大結晶的水分而產(chǎn)生的。

  冰凍時(shí)為防止產(chǎn)生冰晶,漂洗后的固定組織可置30%蔗糖液中處理
12—24h,開(kāi)始時(shí)組織塊是浮的,較后沉入瓶底即可置恒冷箱切片機冷
凍臺上。也可用進(jìn)口的專(zhuān)用冷凍包埋劑(OCTcompound)處理,效果更好
。在冷凍臺的組織置液氮中速凍10min,待組織塊溫度與冷室溫度達到
平衡時(shí)切片。

  冷凍時(shí)常用液氮或其它冷凍劑。固定組織塊冷凍后,由于組織塊過(guò)
度變硬,溫度低于一20℃時(shí)傷刀,要升高箱內溫度至合適溫度(表5—6
,5—7)。

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